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一、材料的性能指标 自动化仪器的大量用于及血液的留存对血样完整性状稳定性明确提出了更高的拒绝,使真空采血技术突破了意味着只为的拒绝,而准确性、标本的完整性状、保持时间及管机因应、试管强度等性能指标都无法忽略,影响标本完整性状及检测准确性的因素有如下几项。1.真空采行血管的材质:以往采行血管多为玻璃材料,普通玻璃的ph差距太远,发炎的可能性大大增加,而拉管工艺制作的玻璃试管线性沟布满,厚薄笔画世间造成细胞的挂壁,玻璃试管的主要成分是亲水性硅酸盐,采血后玻璃试管内壁可经常出现吸附水分子的柔软层,所以,分离出来胶无法必要粘附于玻璃试管的内壁。
随着摆放时间的缩短,红细胞中的钾或者酶等物质,可以通过水分子柔软层向血清中蔓延。所以,玻璃采行血管在原状态下留存血清的期限以2~3d为宜。塑料采行血管常用凝对苯二甲酸(乙二)醇酯(polyethyleneterephthalates,pet)材质制作,是亲水性性质,其管壁不产生水分子层,分离出来胶可牢固地粘附着内壁上,红细胞中的钾无法蔓延到血清中,因而冷藏留存8d血清钾含量恒定。
pet塑料真空采行血管可在-20℃留存标本,这是普通塑料试管和玻璃试管难以达到的。所以,在自由选择真空采行血管时尽可能用pet塑料采行血管为欠佳。2.密封胶塞:密封胶塞的质量直接影响到试管的真空性能及血液样本的完整状态,用于丁基橡胶而不必橡胶,橡胶填料外渗相当严重,是一种可致发炎的材料,许多有机填料和助剂(还包括石蜡油,硅油,柔软剂,着色剂等)在真空状态持续性沿玻璃管壁往下爬到,这类物质特别是在影响真空潮湿的肝素类物质的水溶性而造成炎症。另外其气透性及水透性也不合乎真空管的技术拒绝,真空遗失相当严重,管塞结合部可见塞屑粘壁相当严重。
而丁基橡胶具备较好的塞封性能,溶出物大大减少,使得采行血管即便是在101.3kpa的负压时仍能在24个月内维持真空恒定。真空恒定使采血对象即使有血压及血液粘度的差异,以及采血环境温度的变化仍能维持采血量的比较精确,实际采血量误差可掌控在±5%以内。
二、添加剂的准确用于 添加剂还包括多种成分,如抗凝剂、促凝剂、缓冲剂、保护剂、分离出来胶等,其品种、性能、浓度直接影响血样的性状和检测结果。真空采血技术则在品种、浓度方面做规范完全一致,并能长年保持其有效性,使添加剂对检测结果的影响降至小。由于血液分析的多样性,故抗凝剂的用于种类较多,抗凝及促静原理,效果也不一样,常用的有如下几种。1.血清管(红帽):采行血管内不不含抗凝剂,用作生化、血库和血清学检验。
有的内壁涂抹有硅酮,防止血细胞附壁,避免离心时细胞碎裂,获释细胞内物质至细胞外,影响试验结果。由于这种采行血管内无分离出来胶,血液从凝结到离心须在一小时以上已更加不适应环境目前医院艰巨的工作量的必须,现在有逐步被带上分离出来胶胆凝管所替代。2.分离出来胶胆凝管(黄帽): 血清分离出来胶由亲水性有机化合物和硅石粉构成,是具备触变性的黏液胶体,其结构中所含大量氢键,由于氢键的缔合起到构成网状结构,在离心力的起到下网状结构被毁坏变成黏度较低的流体,当离心力消失之后又新的构成网状结构,这种性质被称作触变性(thixotropy)。即在温度恒定的情况下,对这种黏液胶体特一定的机械力,可从低黏度的凝胶状态变成较低黏度的溶胶状态,如果机械力消失又恢复原低黏度的凝胶状态。
分离出来胶比重保持在1.05,血清比重大约1.02,血块比重大约1.08,当分离出来胶与凝结后的血液在同一试管中离心时,由于对分离出来胶产生离心力而引发硅石汇聚体中的氢键网状结构被毁坏变为链状结构,分离出来胶就沦为黏度较低的物质,比分离出来胶重的血块就移往到管的底部,分离出来胶再次发生返转现象,构成管底部血块、分离出来胶、血清三层。当离心机暂停旋转丧失离心力后,分离出来胶中硅石汇聚体的链状粒子间再度由氢键包含网状结构,完全恢复初始低黏度凝胶状态,在血清和血块间构成隔绝层。血液促凝剂是为了临床检验中较慢分离出来血清标本而研制的促凝剂,一般常用硅石粉、玻璃粉、碳素粉末及蛇毒等促静成分,经类似加工做成粉剂用定量喷雾器均匀分布喷涂在血清分离出来胶真空采行血管内壁上,超过较慢促凝的目的。
3.肝素抗凝管(绿帽):肝素是一种所含硫酸基团的粘多糖,分子量15000,因有硫酸基团,具有强劲的负电荷"其外用静原理为与抗凝血酶2(at2)融合,使at2的精氨酸反应中心更容易与各种丝氨酸蛋白酶起起到,使凝血酶的活性失去。常用其钠、钾、锂盐,100~125u/mg可使5~10ml血液不凝结。
肝素是一种的抗凝剂,对血液成分阻碍较少,不影响红细胞体积,不引发发炎,限于于做到红细胞渗入脆性试验。血气、血浆渗入量、红细胞压积、血沉及普通生化测量"因肝素具备抗凝血酶的起到,不适合于做到血凝试验。过量的肝素不会引发白细胞的挤满,无法用作白细胞计数,因其可使血片染色后背景呈圆形淡蓝色,故不适合于做到白细胞分类。由于肝素无法使离体后的血小板线性,沦为单个颗粒或细胞通过微孔,可导致血小板计数降低,白细胞计数及淋巴细胞计数偏高。
商品肝素经常所含磷酸盐,可使无机磷测量偏高"肝素抗凝血不应于短时间内用于,否则不了了之过久血液又可凝结。4.乙二胺四乙酸(edta)盐管(紫帽):edta与血液中的钙离子螯合,从而使血液不静,一般1.0~2.0mg可制止1ml血液凝固。此抗凝剂不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响小,并且可以诱导血小板的挤满,限于于一般血液学检验。
抗凝剂浓度过低,渗透压下降,导致细胞皱缩。edta溶液ph与盐类关系较小,较低ph可使细胞收缩,edta-k2可使红细胞体积轻度胀大,采血后短时间内平均值血小板体积(mpv)十分不平稳,半小时后趋于稳定。edta-k2使钙、镁上升,同时使肌酸激酶(ck)、碱性磷酸酶(alp)降低,因这些酶测量必须这些金属离子。
edta-k3的欠佳浓度是1.5mg/ml,如果血较少,edta浓度升高,中性粒细胞不会出血分叶消失,血小板不会出血、瓦解,产生长时间血小板大小的碎片,使分析结果产生错误。edta的igm抗体可引发白细胞计数增加,同时导致血涂片时白细胞挤满。
edta由于螯合钙的起到强劲,使二磷酸腺苷(adp)无法引发血小板挤满,另外edta能诱导或干预纤维蛋白凝块构成时纤维蛋白单体单体,呼吸困难用作血凝及血小板功能检查,亦呼吸困难用作钙、钾、钠及含氮物质测量。
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